Ugrás a tartalomhoz

Növényvírusok és virológiai vizsgálati módszerek

dr. Horváth József - dr. Gáborjányi Richard

Mezőgazda Kiadó

Nukleoproteidek azúrkék festése

Nukleoproteidek azúrkék festése

A festéket mindig frissen kell készíteni. A tiazin típusú festékek közül elterjedt az azúr-A, de helyette az azúr-B, toluidin kék is megfelel. A mintát a növényi szövetből ugyanúgy nyerjük, mint az előző festésnél.

  1. 0,1 g azúr-A festéket 100 ml 2-metoxi-etanolban feloldunk. Ebből 18 részt (cseppet) veszünk, ehhez hozzáadunk 2 rész (csepp) 0,2 M Na2HPO4-ot, és összekeverjük.

  2. Ezt követően az előzőekben leírt Calcomine orange–Luxol brilliant green BL (O–G festés) festésnél leírtak szerint járunk el, ha epidermisznyúzattal dolgozunk.

Vastagabb szövetdarabok festése
  1. Eltávolítjuk az epidermiszt, és levéldarabkákat vágunk.

  2. A szövetet 30 percre 100%-os 2-metoxi-etanolba helyezzük, hogy kivonjuk a mintánkból a klorofillt.

  3. Megfestjük azúr-A-val (10–15 perc).

  4. 95%-os etanolban mossuk (10–15 perc).

  5. 15–30 percen át egy lefedett edényben 2-metoxi-etilacetátban áztatjuk, hogy a festékfeleslegtől megszabaduljunk.

  6. A mintát tárgylemezre rögzítjük, majd megvizsgáljuk.

Megjegyzés: Ha ezen a módon nem sikerül a festés (mint a tobamovirusok esetében), akkor az eljárás végén, amikor a szövetdarab már a tárgylemezen van és fedőlemezzel lefedtük, 1–2 percig melegítsük 60 °C-on.